最近有小伙伴提到在液相色譜儀試驗(yàn)中經(jīng)常受到基線波動(dòng)或基線漂移的困擾，下面是氣相色譜儀、液相色譜儀廠家在實(shí)驗(yàn)中積累或從別處了解得出的一些經(jīng)驗(yàn)，整理分享歡迎大家指正。

　　1.液相色譜儀系統(tǒng)沒有平衡好，柱子里的流動(dòng)相一直在變化，在檢測器里面的吸收就會(huì)一直變化，導(dǎo)致基線波動(dòng)的發(fā)生；梯度時(shí)如果其實(shí)比例的流動(dòng)相平衡時(shí)間過短也會(huì)造成基線波動(dòng)；

　　2.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境不穩(wěn)定（比如溫度忽高忽低，氣流不斷變化等），這對于沒有柱溫箱或只有單向溫度變化的HPLC儀器的影響尤其明顯；即使有比較好的柱溫箱時(shí)，也要注意別讓空調(diào)的出風(fēng)口一直對照儀器吹，那樣基線也可能會(huì)波動(dòng)；此外實(shí)驗(yàn)室有電磁干擾時(shí)，也有可能會(huì)導(dǎo)致此問題的發(fā)生；

　　3.液相色譜儀檢測器的流通池被污染，造成吸收的不恒定，此時(shí)需要清洗流通池；

　　4.液相色譜儀檢測器燈能量不足時(shí)，吸收會(huì)變得不穩(wěn)定，這時(shí)基線一般也不穩(wěn)定，特別是在低波長處尤為明顯；

　　5.當(dāng)使用低波長檢測時(shí)，有時(shí)流動(dòng)相會(huì)使用兩相或以上的等度，這時(shí)混合器的很小的混合比例的誤差都會(huì)被放大，很有可能會(huì)使基線發(fā)生波動(dòng)，這時(shí)將流動(dòng)相按比例混合到一個(gè)通道里時(shí)，一般都會(huì)使情況改善很多；

　　6.流動(dòng)相里的有機(jī)相的截止波長最好要大于檢測波長20nm以上，這一點(diǎn)切記，比如甲醇的截止波長是210nm，乙腈是190nm。當(dāng)使用230nm以下的檢測波長時(shí)，如果條件允許，最好使用乙腈，可以避免基線波動(dòng)，其余類推；

　　7.液相色譜儀出現(xiàn)問題也會(huì)造成基線波動(dòng)，比如(1)流動(dòng)相過濾頭堵塞、入口主動(dòng)閥濾芯污染、單向閥被污染物堵塞、泵頭有氣泡、比例閥出故障、系統(tǒng)流路漏液，比如管路裂開、peek接頭沒完全連上色譜柱而導(dǎo)致的泄露等；

　　8.沒有脫氣機(jī)的液相色譜儀，當(dāng)流動(dòng)相未脫氣或脫氣未徹底時(shí)，基線也會(huì)波動(dòng)；有脫氣機(jī)的每次使用前都要檢查一下是否正常工作；

　　9.當(dāng)大家使用梯度作為組分洗脫方式的時(shí)候，有條件的最好使用超純水，磷酸鹽、三乙胺等固體液體加入試劑也最好使用HPLC級別的，因?yàn)樵谔荻戎须S著有機(jī)相（洗脫力較強(qiáng)）的不斷增加，流動(dòng)相系統(tǒng)里的雜質(zhì)會(huì)在基線上反映出來，導(dǎo)致出現(xiàn)鬼峰或基線波動(dòng)；

　　10.流動(dòng)相中的有機(jī)相和緩沖液的比例一定要注意調(diào)配好，緩沖液的比例不能過大，要不然會(huì)出現(xiàn)緩沖鹽在柱子里析出的情況，這樣不但會(huì)造成基線波動(dòng)的發(fā)生，甚至?xí)斐缮V柱毀壞；

　　11.當(dāng)色譜柱被污染時(shí)，也會(huì)造成基線波動(dòng)，這里尤其要注意的是大家在做合成中控實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，最好不要用合成的原始反應(yīng)液直接進(jìn)樣，因?yàn)樵豪锩嬗泻芏喾菢O性或極性很小的化合物，一旦進(jìn)入到反相色譜柱里和非極性的C18發(fā)生相互作用，很可能就洗脫不下來使色譜柱變性或者慢慢的被洗脫下來，造成以后的分析出現(xiàn)不穩(wěn)定的鬼峰或者基線波動(dòng)；

　　12.一些比較老的液相色譜儀對電壓要求很高，電壓有點(diǎn)起伏檢測器就會(huì)反映教明顯，比如老的惠普和島津等儀器，這時(shí)需要配一個(gè)穩(wěn)壓電源來解決此問題；此外儀器和電腦之間連接的數(shù)據(jù)線出問題或老化也可能會(huì)使基線波動(dòng)。