很多用戶在液相色譜柱上都會看到有“->”標(biāo)志，這個標(biāo)志是表示流動相的流動方向，但也有部分色譜柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字樣，翻譯為“決不能反沖”的意思，那么色譜柱是否可以反沖？能不能反沖爭議很大，但在我們的實(shí)踐中，使用色譜柱反沖技術(shù)修復(fù)色譜柱后，收到了柱效有所提高、柱效有所恢復(fù)的效果。那么在什么樣的情況下，我們可以讓色譜柱進(jìn)行反沖技術(shù)呢？跟著譜析色譜小編一起去了解一下。

一、分析氨基酸的離子交換柱時，使用一段時間反柱效明顯下降，用NaOH活化，仍達(dá)不到要求的，可使用NaOH反沖活化即可迅速恢復(fù)柱效，如圖：

二、色譜柱使用一段時間后柱效明顯下降，此時可拆下柱入口端螺帽，去掉1-2mm被污染填料，再用相同填料填滿，然后用流動相反沖一下，可使柱效恢復(fù)正常，因?yàn)榉礇_可以改善柱頭死空間。

三、因反沖可把沉積在過渡板上的細(xì)微顆粒沖走，有時也可用反沖技術(shù)使柱壓降低。

反沖色譜柱的方法：

一、如果是已經(jīng)保存好的色譜柱：1、反向接柱，先用 95水：5 乙腈 0.2 ml/min，沖 20倍柱體積；然后用四氫呋喃，0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；最后用 95 乙腈：5水，0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；如果正向接柱，使用65乙腈水保存色譜柱即可。

二、如果是剛走完樣的色譜柱，那么請按照下列步驟進(jìn)行：

1、卸掉保護(hù)柱；

2、正向接柱，常規(guī)方法沖洗色譜柱（先95水，后95乙腈或甲醇）；

3.反向接柱，先用95水：5乙腈 0.2 ml/min，沖 20倍柱體積；然后用四氫呋喃，0.2 ml/min，沖 20倍柱體積；最后用95乙腈：5水，0.2ml/min，沖 20 倍柱體積；

4.正向接柱，用65乙腈水保存色譜柱即可。

需注意的是：1.20倍柱體積，2504.6mm大概 80ml 1504.6mm大概48ml2.反向接柱時不要鏈接檢測器！