血液中乙醇測定方案-頂空進(jìn)樣氣相色譜法
2021-02-18 17:20:30來源：admin
隨著我國車輛的普及，酒后駕車相關(guān)的交通肇事案件呈 上升趨勢。交通執(zhí)法部門及法醫(yī)在處理此案件時，除作全面 的現(xiàn)場勘察及調(diào)查外，對體內(nèi)血液中乙醇含量的測定至關(guān)重 要。“中華人民共和國公共安全行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”提供了頂空氣相色譜法對血中乙醇的定性定量分析方法，譜析儀器公司對該法進(jìn)行了研究，摸索出適用于基層檢測機構(gòu)的 檢測方法。
材料與方法
1.1主要儀器
GC-17氣相色譜儀，氫火焰離子化檢測 器（FID)。雙通道色譜數(shù)據(jù)工作站。樣品瓶（體積5ml具塞）。PX-16自動頂空進(jìn)樣器。注射器 (1000 μ 1)。精密移液器。
1.2主要試劑
乙醇（色譜純），叔丁醇（色譜純）
1.3方法
儀器條件色譜柱：GDX - 102。載氣為氮氣，流量 50 m 1/m in。氫氣流量30 m 1/m in空氣流量120m 1/m in。溫 度：檢測器190°C；進(jìn)樣器190°C；柱溫170°C。進(jìn)樣量400 μ L 1.3.2分析步驟取空白全血，根據(jù)檢材中醇含量的多少添 加乙醇標(biāo)準(zhǔn)使用液20 μ g~ 2mg內(nèi)標(biāo)液100 μ 1(200 μ g)，密 封瓶口后，混勻，置60C水浴中加熱15m in~20m in。取出后 立即用注射器吸取400 μ 1液上氣體注入氣相色譜，用內(nèi)標(biāo)法 測定乙醇及內(nèi)標(biāo)物叔丁醇的峰面積，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。精確吸 取待測全血0.5ml分別加入樣品瓶內(nèi)，100 μ 1(2 mg/ml) 叔丁醇內(nèi)標(biāo)液，按上述方法平行操作。
結(jié)果與討論
2.1色譜柱的選擇
填充柱GDX- 102通常用來測定白酒，許多基層檢測機 構(gòu)都有配備，將它用于血中乙醇的測定有很好的效果，2 m in 內(nèi)出峰（Q 8m in左右出乙醇峰，1. 7m in左右出叔丁醇峰），分 離效果非常好。
2.2頂空進(jìn)樣器溫度的選擇
因為本法是利用醇類的易揮發(fā)性，以叔丁醇為內(nèi)標(biāo)，用頂 空氣相色譜火焰離子化檢測器進(jìn)行檢測。溫度過低不利 醇類揮發(fā)。溫度過高，易將全血樣品揮干。選擇60°C對結(jié)果變化不大。
2.3 最低檢出濃度
在所選色譜條件下，以基線噪聲的2倍所相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)物 質(zhì)濃度作為最低檢出濃度，按取樣量0. 5 ml計算乙醇最低檢 出濃度為0.78 μ g/ml叔丁醇最低檢出濃度為1.3 μ g/m，l符 合酒后駕車判定檢測工作要求
2.4精密度和準(zhǔn)確度試驗
本試驗的加標(biāo)回收率在97. 6% ~ 104. 8%，相對偏差在 4%以內(nèi)。
本法應(yīng)用價格較低廉的國產(chǎn)色譜及測定酒類的GDX - 102填充柱，用頂空自動進(jìn)樣法測定血液中的乙醇，操作簡 便，重現(xiàn)性好，完全能達(dá)到GA/T105- 1995'"方法的靈敏度， 適用于基層檢測機構(gòu)普及應(yīng)用。
