豆制品中大豆異黃酮液相色譜儀分析檢測
大豆異黃酮是大豆生長中形成的一種次級代謝產(chǎn)物。由于是從植物中提取,與雌激素有相似結(jié)構(gòu),當(dāng)大豆異黃酮的雌激素作用影響到激素分泌、代謝生物學(xué)活性、蛋白質(zhì)合成、生長因子活性,是天然的癌癥化學(xué)預(yù)防劑。平時多食用富含大豆異黃酮的食物有助于抑制前列腺癌細胞的生長,膳食中的大豆異黃酮主要來自大豆和大豆制品。山東譜析儀器采用高效液相色譜儀分析測定豆制品中大豆異黃酮含量,建立了大豆異黃酮的高效液相色譜分析方法。
樣品制備:
稱取10g大豆樣品,用10倍量80%乙醇加熱回流1h后,使用超聲提取30min,將上清液用定性濾紙過濾,濾液移至100ml容量瓶中,用0.32μm濾膜的溶劑過濾器進行過濾;準(zhǔn)確吸取液體樣品10ml與離心管中,采用多功能氮吹儀在50℃溫度下濃縮、結(jié)晶;用5ml乙腈-0.2%乙酸溶液溶解,0.32μm濾膜過濾后移入進樣瓶中供液相色譜儀分析。
檢測儀器:
超高液相色譜儀LC-3000(譜析儀器,配置紫外檢測器,二元高壓泵,手動進樣器)、多功能氮吹儀NC-2012
試劑:甲醇、乙腈(色譜純);水:重蒸水;樣品制備用酒精為分析純;異黃酮標(biāo)準(zhǔn)品大豆甙、黃豆甙、染料木甙、大豆甙元、黃豆甙元、染料木素。
色譜條件:
色譜柱:C18(150mm*6mm,5μm),流動相為乙腈溶液和乙酸溶液,流速為0.15ml/min,柱溫:200℃,進樣量5μL。
使用溶劑過濾器處理制備樣品,保證了樣品純度,有效防止樣品中雜質(zhì)對檢測結(jié)果的影響;水浴氮吹儀對樣品溶劑進行隔絕空氣,高溫加熱結(jié)晶處理,更適于標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的配置。液相色譜儀檢測豆制品中異黃酮的方法重現(xiàn)性好,精密度高,回收率高。
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